分光光度計可以安裝在許多研究、生物學、化學和工業(yè)實驗室中。分光光度計用于不同科學領(lǐng)域的研究和數(shù)據(jù)評估。它提供了高度的精度、靈敏度和準確度。此外，它價格低廉，適用于多種物質(zhì)的測量。分光光度計的作用是傳輸和接收光。分光光度計用于通過使用樣品的光通過并研究波長的強度來評估測試材料的樣品。

　　不同的樣品以多種不同的方式修改光，這使研究人員可以通過觀察光通過樣品時的傳導(dǎo)變化來獲得有關(guān)檢查內(nèi)容的更多事實。

分光光度計的組成

　　有不同類型的分光光度計可用，但它們在結(jié)構(gòu)和部件上都有相似之處。在了解分光光度計的工作原理之前，讓我們概述一下該設(shè)備的組件。

　　燈：光源

　　單色器：隔離光源特定波長帶的一種方法，提供單色光，即所有光子具有相同波長的光

　　比色皿或細胞：樣品架

　　探測器：測量光強的裝置

　　顯示：顯示樣品的透射率和吸光度

分光光度計的工作原理

　　電磁輻射(光)與物質(zhì)之間存在相互作用。分光光度計由兩個儀器組成，即用于產(chǎn)生任何選定顏色(波長)的光的分光計和用于測量光強度的光度計。通過管的光量由光度計測量。光度計將電壓信號傳送到顯示設(shè)備，該信號隨著液體吸收的光量的變化而變化。

　　分光光度計的性能數(shù)據(jù)

　　這些儀器最重要的性能特點是：

　　可測量的量(例如僅吸光度，或吸光度和反射率);

　　可訪問的光譜范圍，理想的是 UV – VIS – IR;

　　光譜分辨率(固定或可變，通常受單色儀限制);

　　吸光度范圍(受光源和檢測器靈敏度限制);

　　給定光譜范圍和分辨率的測量時間;

分光光度計如何工作?

　　以下是分光光度計的工作原理。將樣品溶液置于分光光度計內(nèi)。一盞燈提供光源。光束撞擊衍射光柵，衍射光柵像棱鏡一樣工作，并將光分成其分量波長。一個可調(diào)節(jié)的狹縫只允許一種特定波長的光通過樣品溶液。然后光與樣品相互作用。光的波長照射樣品，樣品保存在比色皿中。我們在處理比色皿時需要小心;即使是輕微的指紋也會干擾結(jié)果。從這一點開始，檢測器測量樣品的透射率和吸光度。

　　透射率是指完全通過樣品并照射到檢測器的光量。吸光度是對樣品吸收的光的測量。檢測器感應(yīng)穿過樣品的光，并將此信息轉(zhuǎn)換為輸出屏幕上的數(shù)字顯示。

　　使用分光光度計的步驟

　　預(yù)熱分光光度計時，機器中不應(yīng)有比色皿;

　　樣品制備;

　　一系列已知濃度的標準溶液;

　　將分光光度計設(shè)置為最大光吸收波長。測量標準的吸光度;

　　將光的百分比透射率設(shè)置為 0%;

　　在樣品空間中，放置一個裝滿溶劑的比色皿并關(guān)閉樣品空間;

　　將透射率設(shè)置為 100%;

　　為了比較，用樣品填充比色皿并將其放置在樣品空間中并關(guān)閉樣品空間;

　　記下光度計上的讀數(shù)以進行計算;

　　繪制標準曲線：吸光度與濃度;

　　使用 Beer-Lambert 方程計算樣品濃度：A = ECL;