“分光光度計,又稱光譜儀,是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。”
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分光光度計的基本工作原理是基于物質(zhì)對光(對光的波長)的吸收具有選擇性,不同的物質(zhì)都有各自的吸收光帶,所以,當(dāng)光色散后的光譜通過某一溶液時,其中某些波長的光線就會被溶液吸收。在一定的波長下,溶液中物質(zhì)的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關(guān)系,即符合比爾定律。
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T = I/Io lg(Io/I)=εcb
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式中,T為透過率,Io為入射光強度,I為透射光強度,A為消光值(吸光度),ε為吸收系數(shù),b為溶液的光徑長度,c為溶液的濃度。從以上公式可以看出,當(dāng)入射光、吸收系數(shù)和溶液厚度一定時,透光率是根據(jù)溶液的濃度而變化的。
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分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
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有區(qū)別,分光色度計與普通色差儀的主要區(qū)別在于,前者是根據(jù)其設(shè)計原理命名的。分光色度計是根據(jù)光譜反射的光譜特性,采用光譜光度分析法對產(chǎn)品顏色進行高精度儀器Lab準(zhǔn)確測量值。其研發(fā)和生產(chǎn)與國際照明委員會完全一致(CIE)標(biāo)準(zhǔn)。此外,分光色度計還可以顯示光譜數(shù)據(jù),為被測物體的顏色提供更具體、更詳細的信息,比如準(zhǔn)確測量顏色的三刺激值XYZ,后者只能測量顏色的三刺激值L*a*b*.因此,使用分光色度計測量顏色時,會得到更加準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。
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原理相同,但是分光測色儀基本用于測量我們的可見光,且精度更高,操作起來更方面。
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